ELISA testi çok sayıda hastalığı tespit eder, bu nedenle tıpta ve daha fazlasında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, ELISA testi en iyi Lyme hastalığının teşhisi ile bilinir. ELISA testi nedir? Sonuçlar nasıl yorumlanır? Testin fiyatı nedir?

İçindekiler:

  1. ELISA testi - neyi tespit ediyor? ELISA
    2. kullanımı
  2. ELISA testi - test nedir?
  3. ELISA testi ve Lyme hastalığı - ne zaman yapılır?
  4. ELISA testi - fiyat. ELISA testinin maliyeti nedir?
  5. ELISA testi - sonuçlar. Yanlış pozitif olabilirler mi?
  6. ELISA testi - sonuçlar. Yanlış negatif olabilirler mi?

ELISA testi , yani enzime bağlı immünosorbent tahlili, diğerlerinin yanı sıra aşağıdakilere hizmet eden yaygın olarak kullanılan bir laboratuvar yöntemidir: kandaki antikorların kantitatif tespiti için

BuELISA testi nedeniylebulunduuygulama Lyme hastalığı gibi bakteriyel hastalıkların teşhisinde Lyme ile

ELISA yönteminin avantajı basitliği, hızlı uygulanması ve yüksek duyarlılığıdır. ELISA yöntemi, hastanın numunesindeki antikorları tespit etmek için tasarlanmış, örneğin Borrelia proteinleri (antijenler) ve spesifik monoklonal antikorlarla dolu kuyulara sahip özel plastik plakalar kullanılarak gerçekleştirilir.

ELISA testi - neyi tespit ediyor? ELISA

kullanımı

ELISA yönteminin yüksek duyarlılığı ve basitliği onu birçok hastalığın tanısında uygulanabilir kılmıştır ancak en çok Lyme hastalığının tanı yöntemi olarak bilinir.

Lyme borreliosis tanısında sözde Test edilen materyalde spesifik IgM veya IgG'nin saptanmasına izin veren dolaylı ELISA. Aynı şekilde, tanı amaçlı antikorlar da tespit edilebilir:

  • viral enfeksiyonlar: herpes virüsleri (herpes, herpes zoster, Epstein-Barr, sitomegalovirüs), HIV, hepatit virüsleri (HBV ve HCV)
  • protozoan enfeksiyonlar: toksoplazmoz, giardiasis
  • otoimmün hastalıklar: çölyak hastalığı (anti-tTG veya anti-DPG antikorları), Hashimoto hastalığı (anti-TG ve anti-TPO antikorları), inflamatuar bağırsak hastalıkları (anti-ASCA ve anti-ANCA antikorları)
  • paraziter hastalıklar ve alerjiler,hangi spesifik IgE antikorlarının tespit edildiği. Artan seviyeleri, örneğin polen ve gıdaya karşı alerjilerin veya parazit istilalarının (silahlı tenya, insan yuvarlak solucanı) varlığını gösterebilir.

ELISA yönteminde (sandviç ELISA olarak adlandırılan) antikorlar dışındaki test edilmiş bir protein örneğinin saptanmasına izin veren modifikasyonlar da vardır. Daha sonra araştırmanın amacı biyolojik materyalde tespit etmektir:

  • virüs veya bakteri parçaları, çoğu zaman bunlar belirli bir patojene özgü antijenlerdir
  • serum hormonları, örneğin östrojen, prolaktin, TSH, fT4, kortizol
  • enzimler örneğin kalprotektin, pankreatik elastaz, alkalin fosfataz
  • tümör belirteçleri, örneğin CA-125
  • serumda ilaç varlığı

Bu yöntem aynı zamanda eser miktarda alerjenlerin (örneğin süt, yer fıstığı), GDO'ların veya gıdalardaki toksinlerin tespit edilebildiği gıda endüstrisinde de kullanılmaktadır.

ELISA testi - bu test nedir?

Örneğin Lyme borreliosis'in ELISA yöntemi kullanılarak teşhisi, biyolojik materyaldeki bağışıklık proteinlerinin - Borrelia antijenlerine karşı yanıt sırasında ortaya çıkan antikorların - tespit edilmesinden oluşur.

Antikorlar, IgM ve IgG olmak üzere iki sınıfta test edilir. IgM'ler, bakterilerle temas halinde vücutta ortaya çıkan ve zamanla azalan ilk antikorlardır.

Onların yerini, vücutta birkaç düzine yıl kalabilen daha kalıcı IgG antikorları alır.

Bu şekilde, özellikle Borrelia spiroketlerine karşı yönlendirilen antikorlar tespit edilerek vücuttaki bakteri varlığı dolaylı olarak test edilir.

Enfeksiyonun çeşitli aşamalarındaki antikorlar, çeşitli Borrelia proteinlerine karşı yönlendirilebilir. Örneğin, erken bir aşamada p41 proteinidir.

Daha sonraki aşamalarda, p21, p30, p39, p43 gibi daha fazla protein ortaya çıkmaya başlar. Bu nedenle Lyme hastalığının teşhisi son derece zordur.

Bakteriyel proteinlerin seçimi, testin yüksek bir tanısal değere sahip olması için son derece önemlidir. Bu nedenle Lyme hastalığının tanısında rutin olarak en güvenilir sonucu elde etmek için protein setlerinin seçildiği II-jenerasyon veya III-jenerasyon ELISA testleri kullanılmalıdır.

ELISA testi ve Lyme hastalığı. Ne zaman performans göstermeli?

Lyme borreliosis, Borrelia burgdorferi bakterisi ve onun birçok çeşidinin neden olduğu bakteriyel bir hastalıktır.

Borrelia'ya karşı bağışıklık tepkisinin karmaşıklığı ve laboratuvar yöntemlerinin kusurları nedeniyle hastalık teşhisi kolay değildir.

En yaygın kullanılan laboratuvar yöntemi, bakteriyel proteinlere karşı oluşan spesifik antikorları tespit eden yüksek hassasiyetli ELISA yöntemidir.

Lyme borreliosis tanısında, aşağıdaki aşamaların ayırt edildiği dolaylı bir ELISA yöntemi kullanılır:

  • hastadan toplanan materyal, örneğin serum ile plaka üzerindeki kuyuların inkübasyonu. Test edilen materyalde Borrelia'ya karşı antikorlar varsa, reaksiyon kuyusunun altındaki proteinlere bağlanırlar
  • daha sonra fazla serum özel bir yıkama sıvısı (tampon) ile durulanır ve sözde konjugat, yani reaksiyon kuyularında önceden bağlanmış antikorlara bağlanan bir enzime bağlı bir antikor
  • Konjugat için substrat sonradan eklenir ve renk reaksiyonu (pozitif) veya yoktur (negatif)
  • son adım, hastanın serumunda Borrelia'ya karşı antikor konsantrasyonunun okuyucu (spektrofotometre) tarafından okunmasıdır

Lyme hastalığı için ELISA yöntemi kanla ve nörolojik semptomlar (nöroborreliosis) durumunda da beyin omurilik sıvısı ile yapılır.

Yanlış pozitif sonuç olasılığı yüksek olduğundan eklem sıvısı test edilmemelidir.

Hastalığın teşhisinin temeli, bunu gösteren klinik semptomlardır ve laboratuvar testlerinin sonuçlarıyla onaylanır.

Sağlıklı insanlarda Borrelia spiroketlerine karşı antikorların da tespit edildiği gösterildiğinden, semptomların varlığı olmadan bir laboratuvar test sonucunun eklenmesi Lyme hastalığı teşhisine izin vermez.

Lyme borreliosisin serolojik teşhisi, yarı nicel bir ELISA tarama testi ile başlar. Sonuç negatifse, bu, Borrelia spiroketlerinin tespit edilmediği veya sonucun yanlış negatif olduğu anlamına gelir.

Sonuç pozitif veya zayıf pozitif (şüpheli) ise, oldukça spesifik olan doğrulayıcı Western blot testi.

Bu, ELISA yöntemiyle elde edilen sonuçların "doğruluğunu" doğrulamak içindir. Teşhis sırasında, yukarıdaki adımlardan hiçbirini atlayamazsınız ve örneğin Western blot yöntemini kullanarak teşhis gerçekleştiremez veya yalnızca ELISA yöntemini kullanarak pozitif bir sonuca dayalı teşhis koyamazsınız.

Polonya'da Lyme hastalığının teşhisi genellikle ilk tarama aşamasında sona erer ve bu da pozitif veya zayıf pozitif sonuçların yanlış yorumlanmasına neden olur.

Bilmeye değer

ELISA testi - fiyat. ELISA testinin maliyeti nedir?

Test ücreti yaklaşık 60zlotys ve hemen yapılır. Ancak sevk sonuçları için yaklaşık üç ay bekleyebilirsiniz.

ELISA testi - sonuçlar. Yanlış pozitif olabilirler mi?

IgM antikorlarının diğer proteinlerle çapraz reaktivitesinden kaynaklanan yanlış pozitif sonuçlar. Vücut tarafından üretilen antikorlar, diğer mikroorganizmaların bir antijenini "yanlış" olarak Borrelia antijeni olarak tanıyabilir.

En yaygın "hatalar" treponema pallidum, herpes virüsleri ile enfekte kişilerde ve sistemik lupus eritematozus ve diğer romatizmal hastalıkları olan kişilerde görülür.

ELISA testi - sonuçlar. Yanlış negatif olabilirler mi?

Yanlış negatif sonuçlar enfeksiyonun erken evresinde görünebilir, daha sonra yaklaşık 3-4 hafta sonra test tekrarlanmalıdır. buna denir serolojik pencere, yani vücudun henüz spesifik antikorlar üretmeyi "başaramadığı" ilk enfeksiyon dönemi.

Benzer şekilde, yeterli antikor üretmeyen bağışıklığı baskılanmış kişilerde.

Özellikle çok yoğun enfeksiyonlarda büyük bir sorun, sözde Borrelia spirochetes antijenlerinden ve onlara özgü antikorlardan oluşan bağışıklık kompleksleri.

Bu, antikorları ELISA gibi yaygın olarak kullanılan yöntemlere "görünmez" yapar ve test edilen materyalde bulunmalarına rağmen tespit edilemezler.

Bu gibi durumlarda laboratuvar, bağışıklık komplekslerini parçalayabilir. Bu tedavi antikorları serbest bırakmak için tasarlanmıştır. Ancak laboratuvarlarda standardizasyon eksikliği nedeniyle bu yöntem yaygın olarak kullanılmamaktadır.

Bilmeye değer

Lyme hastalığı teşhisi neden kolay değil?

Bu, Borrelia'ya karşı bağışıklık tepkisinin karmaşıklığından ve laboratuvar yöntemlerinin sınırlamalarından kaynaklanmaktadır. Çeşitlerin çeşitliliği ve özellikle Avrupa kıtasında enfeksiyonlara neden olan yeni enfeksiyonların ortaya çıkması, etkili teşhis yöntemlerinin geliştirilmesini kolaylaştırmamaktadır.

Son zamanlarda Avrupa'da Borrelia bissetii, Borrelia valaisiana ve Borrelia spielmanii gibi daha fazla çeşit ortaya çıktı. Ayrıca vücutta Borrelia spiroketleri kistlere dönüşebilir veya vücudun bağışıklık sistemi hücrelerinin erişemeyeceği yerlerde kalabilir.

Böylece bağışıklık sistemine "görünmez" olmak. Ek olarak, dokuların güçlü bir şekilde proinflamatuar özelliklere sahip bakteri parçaları içerebileceği gösterilmiştir. Çalışmadaki olumsuz sonuçlara rağmen, Lyme hastalığının kronik semptomlarından sorumlu olduklarına inanılıyor.laboratuvar

Referanslar

1. Witecka-Knysz E. ve diğerleri Lyme hastalığı: teşhis neden bu kadar zor? Laboratuvar teşhis uzmanı Nisan 2007.2. Moore A. ve arkadaşları Güncel Kılavuzlar, Ortak Klinik Tuzaklar ve Lyme Hastalığının Laboratuvar Tanısı için Gelecekteki Yönergeler, Amerika Birleşik Devletleri. Acil Enfeksiyon Dis. 2016 Temmuz 22 (7) .3. Kene kaynaklı hastalıkların laboratuvar teşhisi Çalışma Grubunun Önerileri: Ulusal Laboratuvar Teşhis Uzmanları Odası, Ulusal Halk Sağlığı Enstitüsü-Ulusal Hijyen Enstitüsü, Bulaşıcı hastalıklar alanında Ulusal Danışman, Enfeksiyon Hastalıkları ve Nöroenfeksiyonlar Anabilim Dalı, Tıp Üniversitesi Białystok, Polonya Viroloji Derneği, Varşova 2014. Hosseini S. i co: Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) A'dan Z'ye Springer 2022.

Yazar hakkındaKarolina Karabin, MD, PhD, moleküler biyolog, laboratuvar teşhis uzmanı, Cambridge Diagnostics PolskaMesleği mikrobiyolojide uzmanlaşmış bir biyolog ve laboratuvar çalışmalarında 10 yılı aşkın deneyime sahip bir laboratuvar teşhis uzmanı. Moleküler Tıp Fakültesi mezunu ve Polonya İnsan Genetiği Derneği üyesi Varşova Tıp Üniversitesi Hematoloji, Onkoloji ve İç Hastalıkları Bölümü Moleküler Tanı Laboratuvarı'nda araştırma bursu başkanı. Varşova Tıp Üniversitesi 1. Tıp Fakültesi'nde tıbbi biyoloji alanında tıp bilimleri doktoru unvanını savundu. Laboratuvar teşhisi, moleküler biyoloji ve beslenme alanında birçok bilimsel ve popüler bilim eserinin yazarı. Günlük olarak, laboratuvar teşhisi alanında bir uzman olarak, Cambridge Diagnostics Polska'da içerik departmanını yönetiyor ve CD Diyet Kliniğinde bir beslenme uzmanları ekibiyle işbirliği yapıyor. Hastalıkların teşhisi ve diyet tedavisi konusundaki pratik bilgilerini konferanslarda, eğitimlerde, dergilerde ve web sitelerinde uzmanlarla paylaşıyor. Özellikle modern yaşam tarzının vücuttaki moleküler süreçler üzerindeki etkisiyle ilgileniyor.

Kategori:

Araştırma